大肠杆菌噬菌体 P1基本信息
培养基 | 营养肉汁培养基(英文名:NA/NB):牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,琼脂 20.0g(液体培养基不含),蒸馏水 1.0L,pH 7.0。121℃,15min灭菌。[注]培养芽孢杆菌时加入5mgMnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。 |
传代方法 | ①宿主菌准备:从平板上挑取宿主菌单菌落,溶解于 40-50mL 营养肉汤培养基中,37℃,160-180 rpm 振荡培养至 OD600 为 0.1 - 0.4 ; ②打开冻干管:安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎; ③溶解冻干粉:吸取 0.5mL 营养肉汤打入冻干管,充分溶解后打入宿主菌液三角瓶; ④培养:三角瓶置于 37℃,摇床 160-180rpm 培养条件下培养过夜; ⑤过滤:16-18h 后将噬菌体培养物以 4000g 离心 10 分钟,用 0.2 μm 无菌过滤器过滤裂解物,可以过滤 2 次以完全去除宿主,滤液可在 4℃下保存。 |
生长条件 | 37℃;18-24h;好氧 |
存储条件 | 2-8℃ |
安全等级 | 1 |
形态 | 噬菌体和宿主菌共培养浑浊,噬菌斑小,建议用双层琼脂法观察噬菌斑。 |
共享方式 | 公益性共享 |