pBR322基本信息
| 培养基 | LB+50mcg/ml氨苄青霉素：酵母膏 5.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 10.0g，蒸馏水 1.0L，pH 7.0。121℃，15min灭菌。灭菌结束后，培养基冷却至40-50℃时加入链霉素，浓度50mcg/ml。 |
| 传代方法 | 1.溶解： 收到质粒干粉后，请加入 20μl 无菌水至管底，溶解质粒，室温静置 1min； 2.混合（吸附质粒）： 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10μl 混匀，冰上放置 30min； 3.热激导入： 42℃静置 90s； 4.收缩膜孔： 冰浴 2min； 5.修复培养： 毎管加 800μl LB 液体培养基，37 ℃培养 1h 150 r/min； 6.筛选培养： 将适当体积（100 μl）的复苏细胞，涂布在相应抗性的 LB 平板上，正置平皿 30min（琼脂面务必干燥后）， 倒置培养 12-16h，出现菌落。 7.提取： 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中，震荡培养 12-16h，根据试验需要提取质粒。 |
| 生长条件 | LB+氨苄青霉素，37℃（克隆菌株DH5α） |
| 存储条件 | 2-8℃ |
| 安全等级 | 1 |
| 应用领域 | 质粒载体，空载体 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
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