小鼠胚胎成纤维细胞基本信息
| 培养基 | DMEM小牛血清完全培养基：90%DMEM-H+10%CS |
| 传代方法 | 复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。 细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。 |
| 生长条件 | 培养温度37℃；气体环境5%CO2+95%空气； |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 存储条件 | 液氮 |
| 安全等级 | 1 |
| 形态 | 成纤维细胞样，短梭形，边缘不规则，单层贴壁生长，背景干净 |
| 分离基物 | NIH Swiss 小鼠 |
| 应用领域 | 与原始的随机交配3T3和近交系BALB/c 3T3建株方法-样, NIH/3T3 ,是从NIH Swiss小鼠胚胎培养物中建立的高度接触抑制 的连续细胞株。为了培育在形态学特征上更适合于进行转化分析的亚株,建立的NIH/3T3细胞株又进行了五轮以上亚克隆。 这株细胞对DNA转化及转染研究十分有用。检测表明肢骨发育畸形病毒(鼠痘)阴性。 |
| 共享方式 | 公益性共享 |
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