猪肺泡巨噬细胞基本信息
培养基 | RPMI-1640完全培养基:90%RPMI-1640+10%FBS |
传代方法 | 复苏步骤:①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速没入37℃水浴锅,摇晃冻存管加速溶解,以1min内全部溶解为宜;②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内,1000-1200rpm离心5min,弃去上清液,用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中,放入培养箱培养。 细胞传代:①将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入1-2mL胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处,肉眼可见细胞层脱落,即消化完成,否则继续消化),直接吸掉胰酶,加入5-6mL完全培养基,轻轻吹打细胞层,把细胞层吹落,吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养。;④注意培养基pH值变化和细胞密度,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%-90%时,重复传代操作或者冻存。 |
生长条件 | 培养温度37℃;气体环境5%CO2+95%空气; |
生长特性 | 贴壁生长 |
存储条件 | 液氮 |
安全等级 | 1 |
形态 | 上皮细胞样,多角形 |
分离基物 | 1998年12月,利用 psv3neo 等离子体转染原代培养的猪单肾样细胞系3d4,经 g-418克隆和筛选,获得3d4 / 2(atcc crl-2845)、3d4 / 21(atcc crl-2843)和3d4 / 31(atcc crl-2844)。 |
应用领域 | 这些猪骨髓单核细胞系可能在猪病毒学和免疫学研究中有广泛的应用。 |
共享方式 | 公益性共享 |