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NK-92与NK-92MI培养注意事项

2023-04-21 16:04 已有人浏览 小编

1.NK-92细胞为悬浮生长,大部分细胞聚集成团,少数细胞分散,并且细胞间隙会有较多的死细胞和细胞碎片; 2.NK-92细胞对IL-2敏感。培养基中IL-2降解,将导致细胞状态变差。IL-2在-20℃解冻后置于4℃冰箱保存,4℃保存不应超过一周。配制好的新鲜培养基要尽快用完,建议每次使用前拿出来预热,使用完毕后放回4℃冰箱保存; 3. NK-92细胞对离心敏感。正常培养时,换液周期为2~3天,建议交替使用半量换液和离心换液法,即半量换液2~3次后,离心全量换液一次。尽量减少离心次数,细胞状态不佳或细胞量少的时候,一般不建议离心; 4. NK-92细胞对机械力较敏感。正常培养时,应尽量避免吹打力道过大。暴力吹打会使死细胞和细胞碎片增加。 5.正常培养时,NK-92细胞团的间隙有部分死细胞和细胞碎片是正常的,如细胞碎片过多,可通过低速离心去除部分细胞碎片(800rpm,5min)。 6.血清质量差异可能引起细胞状态变化,建议选用高质量的胎牛血清。 7.细胞生长时,聚集的细胞团会逐渐增大,正常的细胞团在显微镜下呈现白色透亮状。若细胞聚集太多,出现细胞团中部发暗时,可传代; 8.细胞对培养液营养要求很高,在正常培养过程中应避免细胞团块太大,这会导致营养不足;细胞团块过大时,需要稍微吹散,注意控制吹打次数,不需刻意吹散成单个细胞。 9.NK-92的传代方法:将细胞团用移液器轻轻吹散,均分到两个瓶子里,每瓶再补充等量培养基。 10.NK-92的冻存方法:细胞冻存的时候,细胞需要尽量分散,否则影响冻存效果。


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